光度計主要是用來測量不同波長的光譜，從而對物質(zhì)進行定量分析。西安紫外可見分光光度計是對波長在紫外光區(qū)里波長的測量，測量的原理是，物質(zhì)的吸收光譜本質(zhì)上就是物質(zhì)中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長的光能量， 相應地發(fā)生了分子振動能級躍遷和電子能級躍遷的結(jié)果。由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子 、原子和不同的分子空間結(jié)構(gòu)，其吸收光能量的情況也就不會相同，因此，每種物質(zhì)就有特有的、固定的吸收光譜曲線，可根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長處的吸光度的高低判別或測定該物質(zhì)的含量，這就是分光光度定性和定量分析的基礎。紫外可見分光光度計的應用波長范圍為200～400nm的紫外光區(qū)、400～850nm的可見光區(qū)。
紫外可見分光光度計主要用于對物質(zhì)的分析，與標準物及標準圖譜對照，比較最大吸收波長吸收系數(shù)的一致性。也可用于推測化合物的分子結(jié)構(gòu)及絡合物組成及穩(wěn)定常數(shù)的測定。在外分光光度計一般都設有雙通道，其中一個通道是拿來放空白樣的，也可以說是參比樣。操作的時候，首先是將兩個比色皿都充滿空白液，用其中一個為基準調(diào)零，然后再測另一個比色皿，記下讀書，這個是空白0對應的吸光度值，也就是由于比色皿不同帶來的誤差，在作圖的時候是要算進去的。然后，把那個認為是樣品的比色皿里的空白液換成真正的樣品，測量其吸光度值。通過雙通道，可以避免比色皿不同帶來的誤差。使用紫外分光光度計之前，要調(diào)零、調(diào)百校準，參比溶液又稱空白溶液。測量時用作比較的、不含被測物質(zhì)但其基體盡可能與試樣溶液相似的溶液。通常，用參比溶液掃描的曲線應是一條平坦的直線。有時，基體中雖不含被測物質(zhì)，但含有別的物質(zhì)，這時必須保證其不影響測試。經(jīng)常碰到的是試劑空白中含有被測物質(zhì)，此時必須經(jīng)過純化將其除去，否則將影響測定結(jié)果。在色譜分析中，有時基體中可能存在一個以上的和被測組分相距較遠的色譜峰，計算機在數(shù)據(jù)處理中不會計入它們，不影響測定。參比溶液與測量溶液就相差鐵離子含量，在測量之前要用不含鐵離子的參比溶液掃描，調(diào)整儀器后（調(diào)100的過程），然后再測量含鐵離子溶液的比色皿，這樣測量溶液中的鐵離子會形成自己特定的峰值，次峰值與數(shù)據(jù)庫里基準峰值對比就可以得出溶液所含量了。如果數(shù)據(jù)庫中沒有鐵離子的曲線，你還要自己先用不同鐵離子濃度的溶液做工作曲線，然后進行測量。
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